Taq DNA Polymerase (Without dNTP)

Opis produktu

Produkt ten jest wytwarzany poprzez ekspresje genu Taq DNA Polymerase (pochodzącego z Thermus aquaticus) w komórkach Escherichia coli. Po wieloetapowej procedurze oczyszczania uzyskuje się wysokiej czystości enzym, pozbawiony aktywności endonukleaz, egzonukleaz oraz DNA bakteryjnego.

Taq DNA Polymerase posiada aktywność polimerazy 5’→3’ oraz aktywność egzonukleazy 5’→3’, ale nie posiada aktywności (3’→5’ egzonukleazy). Produkty PCR generowane przez Taq mają wolny koniec 3’ z adeniną (A-overhang), co umożliwia ich klonowanie do wektorów T oraz zastosowanie w zestawie CloneUFO® do szybkiego klonowania.

Warunki przechowywania

• Przechowywać w temperaturze -20℃.

• Transportować w temperaturze od -20℃ do 0℃.

• Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania.

Definicja jednostki enzymatycznej

Jednostka aktywności (1 U) definiowana jest jako ilość enzymu, która w 30 minut w 74℃, wykorzystując jako matrycę/primery aktywowane DNA z nasienia łososia, inkorporuje 10 nmol deoksynukleotydów do nierozpuszczalnych w kwasie produktów DNA.

Kontrola jakości

• Test na pozostałości egzonukleaz:
  20 U enzymu inkubowano z 0,6 μg λ-Hind III w 74℃ przez 1 godzinę – brak zmian w obrazie elektroforetycznym DNA.

• Test na pozostałości endonukleaz:
  10 U enzymu inkubowano z 1 μg λDNA w 37℃ przez 4 godziny – brak degradacji DNA widocznej na żelu agarozowym.

• Test na obecność RNaz:
  20 U enzymu inkubowano z 1 μg całkowitego RNA z komórek Hela w 37℃ przez 30 minut – RNA pozostało nienaruszone.

• Test na obecność bakteryjnego DNA (E. coli):
  W 50 μl reakcji z ddH₂O jako matrycą próbowano amplifikować gen 16S rDNA bakterii E. coli. Po 30 cyklach brak sygnału na 1% żelu agarozowym – brak kontaminacji.

• Test funkcjonalny:
  Amplifikacja 10 ng λDNA przez 30 cykli. Widoczne pojedyncze, wyraźne pasmo na żelu agarozowym (1%) – reakcja skuteczna.

Skład produktu