M-MLV (H-) Reverse Transcriptase

Opis produktu

M-MLV (H–) Reverse Transcriptase to wysokowydajna odwrotna transkryptaza uzyskana w drodze inżynierii genetycznej na bazie wirusa białaczki Moloneya (Moloney Murine Leukemia Virus, M-MLV). Enzym produkowany jest w komórkach E. coli, a następnie poddawany oczyszczaniu.

Charakteryzuje się:

• aktywnością DNA polimerazy zależnej od RNA,

• aktywnością DNA polimerazy zależnej od DNA,

• brakiem aktywności RNazy H,

• zachowaną pełną strukturą białka (w przeciwieństwie do niektórych mutantów),

• długim okresem półtrwania i dobrą stabilnością termiczną.

Dzięki zdolności do przemieszczenia nici (strand displacement) jest idealny do:

• syntezy pełnej długości cDNA,

• konstruowania bibliotek cDNA,

• technik takich jak 5' RACE.

Warunki przechowywania

• Przechowywać w temperaturze -20℃

• Transport: od -20℃ do 0℃

• Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania

Definicja jednostki aktywności

Jednostka (1 U) to ilość enzymu niezbędna do wbudowania 1 nmola dTTP do nierozpuszczalnych w kwasie produktów w ciągu 10 minut w 37℃, przy użyciu matrycy Poly(rA)·Oligo(dT).

Kontrola jakości

• Egzonukleazy: brak degradacji 50 pmol ssDNA po 16 h w 37℃ (PAGE).

• Endonukleazy: brak degradacji 0,5 μg plazmidu po 4 h inkubacji w 37℃ (żel agarozowy).

• RNazy: brak degradacji 1 μg RNA po 30 min w 37℃.

• DNA E. coli: pozostałości DNA genomowego <10 kopii (wg qPCR).

• Test funkcjonalny: skuteczna synteza cDNA z 1 μg RNA i Oligo(dT)₁₈, widoczne pojedyncze pasmo 4,6 kb po PCR.

Skład zestawu